Ташаккур ба шумо барои боздид аз www.chinacdoe.com.Версияи браузере, ки шумо истифода мебаред, дастгирии маҳдуди CSS дорад.Барои таҷрибаи беҳтарин, мо тавсия медиҳем, ки шумо браузери навшударо истифода баред (ё Ҳолати мутобиқатро дар Internet Explorer хомӯш кунед).Дар ҳамин ҳол, барои таъмини дастгирии доимӣ, мо сайтро бе услубҳо ва JavaScript пешкаш хоҳем кард.
Системаҳои лабораторӣ дар чип бо қобилиятҳои дар макон ҷойгиршуда потенсиали ташхиси зуд ва дақиқро пешниҳод мекунанд ва дар шароитҳои маҳдуди захираҳо муфиданд, ки таҷҳизоти биотиббӣ ва мутахассисони ботаҷриба дастрас нестанд.Бо вуҷуди ин, таъсиси системаи санҷиши нуқтаи нигоҳубин, ки ҳамзамон дорои тамоми хусусиятҳои зарурӣ барои тақсимоти бисёрфунксионалӣ, баровардани талабот, иҷрои боэътимод ва нигоҳдории дарозмуддати реагентҳо як мушкили асосӣ боқӣ мемонад.Дар ин ҷо мо технологияи гузариши микросаёҳати бо фишанги фаъолро тавсиф мекунем, ки метавонад моеъҳоро дар ҳама самт идора кунад, вокуниши дақиқ ва мутаносиби фишори ҳаворо таъмин кунад ва дар муқобили ҳаракатҳои ногаҳонӣ ва ларзиш устувор бошад.Дар асоси технология, мо инчунин таҳияи системаи реаксияи занҷири полимеразиро тавсиф мекунем, ки функсияҳои воридкунии реагентҳо, омехта ва реаксияро дар як раванд муттаҳид мекунад, ки иҷрои "намуна дар ҷавоб" -ро барои ҳама намунаҳои клиникии бинии 18 беморони гирифтори Зуком ва 18 назорати инфиродӣ дар мувофиқати хуби шиддатнокии флуоресцент бо реаксияи занҷири полимеразӣ (коэффисиентҳои Пирсон > 0,9).Дар асоси технология, мо инчунин рушди системаи реаксияи занҷири полимеразиро тавсиф мекунем, ки функсияҳои воридкунии реагент, омехта ва реаксияро дар як раванд муттаҳид мекунад, ки иҷрои "намуна дар ҷавоб" -ро барои ҳама намунаҳои бинии клиникии 18 бемор иҷро мекунад. бо зуком ва 18 назорати инфиродӣ, дар мувофиқати хуби шиддатнокии флуоресцент бо реаксияи занҷири полимеразӣ (коэффитсиентҳои Пирсон > 0,9).Основываясь дар этой технологии, мй инчунин ба кор андохтани системам реак-цияи полимеразй, ки дар процесси реакционй ва реак-цияхо истифода бурда мешавад, дар процесси якхела, ки дар як процесси реакционй истифода бурда мешавад. 18 беморов с Грипп и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флюорессенции бо реаксияҳои стандартии полимеразной цепной (коэффитсиенти Пирсона> 0,9).Дар асоси ин технология, мо инчунин таҳияи системаи реаксияи занҷири полимеразиро тавсиф мекунем, ки функсияҳои тазриқӣ, омехта ва реаксияро дар як раванди ягона муттаҳид намуда, имкон медиҳад, ки барои ҳама намунаҳои клиникии бинии 18 беморони зуком гирифта шаванд.ва 18 назорати инфиродӣ мувофиқи мувофиқ бо шиддатнокии флуоресценти реаксияи занҷири полимеразӣ (коэффитсиентҳои Пирсон > 0,9).Дар асоси ин технология, мо инчунин рушди системаи реаксияи занҷири полимеразро тавсиф мекунем, ки функсияҳои тазриқӣ, омехта ва реаксияро барои таҳлили ҳама намунаҳои бинии клиникӣ аз 18 намунаи бемори бинии бинӣ муттаҳид мекунад. Зуком ва 18 назорати инфиродӣ, шиддатнокии флуоресцент мувофиқат мекунад. хуб бо реаксияи занҷири полимеразӣ (коэффисиенти Пирсон > 0,9).Платформаи пешниҳодшуда автоматизатсияи боэътимоди таҳлили биотиббиро кафолат медиҳад ва ба ин васила метавонад тиҷоратикунонии як қатор дастгоҳҳои санҷишии нуқтаи нигоҳубинро суръат бахшад.
Бемориҳои пайдошавандаи инсонӣ, аз қабили пандемияи COVID-19 дар соли 2020, ки ҷони миллионҳо одамонро аз байн бурд, ба саломатии ҷаҳонӣ ва тамаддуни башар хатари ҷиддӣ эҷод мекунанд1.Муайян кардани барвақт, зуд ва дақиқи бемориҳо барои мубориза бо паҳншавии вирус ва беҳтар кардани натиҷаҳои табобат муҳим аст.Экосистемаи асосии ташхис дар лабораторияҳои мутамарказ, ки намунаҳои санҷишӣ ба беморхонаҳо ё клиникаҳои ташхисӣ фиристода мешаванд ва аз ҷониби мутахассисон идора карда мешаванд, айни замон дастрасии тақрибан 5,8 миллиард нафарро дар саросари ҷаҳон, бахусус онҳое, ки дар муҳити маҳдуди захираҳо зиндагӣ мекунанд, маҳдуд мекунад.ки дар он чо тачхизоти гаронбахои биотиббй ва мутахассисони сохибихтисос намерасанд.духтурон 2. Ҳамин тариқ, зарурати таъҷилӣ ба таҳияи як системаи арзон ва барои истифодабаранда-дӯстонаи лабораторияи чип бо қобилияти санҷиши нуқтаи нигоҳубин (POCT), ки метавонад ба духтурон маълумоти саривақтии ташхисро барои қабули қарорҳои огоҳонаи ташхис таъмин намояд. .ва табобат 3.
Дастурҳои Созмони Умумиҷаҳонии Тандурустӣ (ТУТ) мегӯянд, ки POCT-и идеалӣ бояд дастрас, барои корбарон осон (истифода бо омӯзиши ҳадди ақал), дақиқ (аз манфиҳои бардурӯғ ё мусбатҳои бардурӯғ канорагирӣ кунед), зуд ва боэътимод (хусусиятҳои хуби такроршавандаро таъмин кунад) ва расонидашаванда (қобилияти нигоҳдории дарозмуддат ва ба осонӣ ба корбарони ниҳоӣ дастрас)4.Барои қонеъ кардани ин талабот, системаҳои POCT бояд хусусиятҳои зеринро таъмин кунанд: миқдори гуногунҷабҳа барои кам кардани дахолати дастӣ, баровардани миқёси интиқоли реактив барои натиҷаҳои дақиқи санҷиш ва иҷрои боэътимод барои муқовимат ба ларзиши муҳити зист.Дар айни замон, дастгоҳи аз ҳама васеъ истифодашавандаи POCT рахи ҷараёни паҳлуӣ5,6 мебошад, ки аз якчанд қабатҳои мембранаҳои нитроцеллюлозаи ковок иборат аст, ки миқдори хеле ками намунаро ба пеш тела дода, бо реагентҳои қаблан иммобилизатсияшуда бо қувваи капиллярӣ реаксия мекунанд.Ҳарчанд онҳо бартарии арзиши паст, осонии истифода ва натиҷаҳои зуд доранд, дастгоҳҳои рахи ҷараёни POCT метавонанд танҳо барои санҷишҳои биологӣ (масалан, санҷишҳои глюкоза7,8 ва санҷишҳои ҳомиладорӣ9,10) бидуни ниёз ба таҳлилҳои бисёрмарҳала истифода шаванд.реаксияҳо (масалан, боркунии реактивҳои сершумор, омехта, мултиплекс).Илова бар ин, қувваҳои ҳаракатдиҳандае, ки ҳаракати моеъро назорат мекунанд (яъне, қувваҳои капиллярӣ) мутобиқати хубро таъмин намекунанд, махсусан дар байни гурӯҳҳо, ки дар натиҷа такроршавандагии суст11 мегардад ва бандҳои ҷараёни паҳлуиро пеш аз ҳама барои муайянкунии хуб муфид месозад12,13.
Имкониятҳои васеъшудаи истеҳсолӣ дар миқёси микро ва нано барои таҳияи дастгоҳҳои микрофлюидикии POCT барои андозагирии миқдорӣ имконият фароҳам оварданд14,15,16,17.Тавассути танзими хосиятҳои интерфейси 18, 19 ва геометрияи каналҳои 20, 21, 22 қувваи капиллярӣ ва суръати ҷараёни ин дастгоҳҳоро идора кардан мумкин аст.Бо вуҷуди ин, эътимоднокии онҳо, махсусан барои моеъҳои хеле таршуда, аз сабаби нодурустии истеҳсолӣ, нуқсонҳои моддӣ ва ҳассосият ба ларзишҳои муҳити зист қобили қабул нест.Илова бар ин, азбаски ҷараёни капиллярӣ дар интерфейси гази моеъ ба вуҷуд меояд, ҷараёни иловагиро ворид кардан мумкин нест, хусусан пас аз пур кардани канали микрофлюидӣ бо моеъ.Аз ин рӯ, барои муайян кардани мураккабтар, якчанд марҳилаи тазриқи намуна бояд иҷро карда шавад24,25.
Дар байни дастгоҳҳои микрофлюидӣ, дастгоҳҳои микрофлюидикии марказӣ айни замон яке аз беҳтарин ҳалли POCT26,27 мебошанд.Механизми пешбарии он аз он фоиданок аст, ки қувваи пешбарандаро тавассути танзими суръати гардиш идора кардан мумкин аст.Бо вуҷуди ин, нуқсон дар он аст, ки қувваи марказгурез ҳамеша ба канори берунии дастгоҳ нигаронида шуда, иҷрои реаксияҳои бисёрқадамро, ки барои таҳлилҳои мураккабтар заруранд, душвор мегардонад.Гарчанде ки қувваҳои иловагии ҳаракаткунанда (масалан, капиллярҳои 28, 29 ва бисёр дигарон 30, 31, 32, 33, 34, 35) ба ғайр аз қувваи марказгурезӣ барои миқдори бисёрфунксионалӣ ҷорӣ карда мешаванд, интиқоли ғайричашмдошти моеъ ҳоло ҳам метавонад рух диҳад, зеро ин қувваҳои иловагӣ одатан фармоишӣ мебошанд. бузургӣ аз қувваи марказгурез пасттар аст, ки онҳоро танҳо дар доираи хурди корӣ самаранок мегардонад ё дар ҳолати талаб бо баровардани моеъ дастрас нест.Дохил кардани манипуляцияҳои пневматикӣ ба микрофлюидикҳои марказӣ, аз қабили усулҳои кинетикии марказӣ 36, 37, 38, усулҳои термопневматикӣ 39 ва усулҳои фаъоли пневматикӣ 40 алтернативаи ҷолибро исбот карданд.Бо равиши контрфугодинамикӣ, як холигии иловагӣ ва микроканалҳои пайвасткунанда ба дастгоҳ барои амали берунӣ ва дохилӣ муттаҳид карда мешаванд, гарчанде ки самаранокии насоси он (дар ҳудуди аз 75% то 90%) аз шумораи давраҳои насосӣ ва часпак вобаста аст. аз моеъ.Дар усули термопневматикӣ, мембранаи латексӣ ва камераи интиқоли моеъ махсусан барои мӯҳр кардан ё боз кардани вуруд ҳангоми гарм кардани ҳаҷми ҳавои дармондашуда тарҳрезӣ шудааст.Бо вуҷуди ин, танзимоти гармидиҳӣ/сардкунӣ мушкилоти вокуниши сустро ба вуҷуд меорад ва истифодаи онро дар таҳлилҳои гармидиҳӣ маҳдуд мекунад (масалан, тақвияти реаксияи занҷири полимеразӣ (PCR)).Бо равиши фаъоли пневматикӣ, озодкунии талабот ва ҳаракати дохилӣ тавассути истифодаи ҳамзамон фишори мусбӣ ва суръати гардиши дақиқи мувофиқи муҳаррикҳои баландсуръат ба даст оварда мешавад.Дигар равишҳои муваффақ мавҷуданд, ки танҳо фаъолкунакҳои пневматикӣ (фишори мусбат 41, 42 ё фишори манфӣ 43) ва тарҳҳои клапанҳои маъмулан пӯшида истифода мешаванд.Бо пай дар пай фишор овардан дар камераи пневматикӣ моеъ ба таври перисталтикӣ ба пеш интиқол дода мешавад ва клапани маъмулан пӯшида ҷараёни бозгашти моеъро аз перисталтика пешгирӣ мекунад ва ҳамин тавр амалиёти мураккаби моеъро амалӣ мекунад.Бо вуҷуди ин, дар айни замон танҳо шумораи маҳдуди технологияҳои микрофлюидӣ мавҷуданд, ки метавонанд амалиёти мураккаби моеъро дар як дастгоҳи POCT иҷро кунанд, аз ҷумла тақсимоти бисёрфунксионалӣ, баровардани талабот, иҷрои боэътимод, нигоҳдории дарозмуддат, коркарди моеъҳои часпакии баланд, ва истехсоли камхарч.Ҳама дар як вақт.Набудани як амалиёти функсионалии бисёрқадам инчунин метавонад яке аз сабабҳои он бошад, ки то имрӯз танҳо чанд маҳсулоти тиҷоратии POCT ба монанди Cepheid, Binx, Visby, Cobas Liat ва Rhonda бомуваффақият дар бозори озод ҷорӣ карда шудаанд.
Дар ин мақола, мо як фаъолкунандаи микрофлюидикии пневматикиро пешниҳод мекунем, ки дар асоси технологияи микро коммутаторҳои ҳалқаи сабз (FAST) асос ёфтааст.FAST тамоми хосиятҳои заруриро дар як вақт барои доираи васеи реагентҳо аз микролитр то миллилитр муттаҳид мекунад.FAST аз мембранаҳои эластикӣ, фишангҳо ва блокҳо иборат аст.Бе фишори ҳаво мембранаҳо, фишангҳо ва блокҳоро маҳкам баста, моеъи дохили онро муддати дароз нигоҳ доштан мумкин аст.Вақте ки фишори мувофиқ татбиқ карда мешавад ва ба дарозии фишанг мувофиқ карда мешавад, диафрагма васеъ мешавад ва фишангро ба ҳолати кушод тела медиҳад ва имкон медиҳад, ки моеъ аз он гузарад.Ин имкон медиҳад, ки миқдори бисёрфунксионалии моеъҳо ба таври каскад, ҳамзамон, пайдарпай ё интихобӣ гузаронида шавад.
Мо системаи PCR-ро бо истифода аз FAST барои тавлиди натиҷаҳои посух дар намуна барои ошкор кардани вирусҳои зукоми А ва В (IAV ва IBV) таҳия кардем.Мо ба лимити поёнии ошкор (LOD) 102 нусха/мл расидем, таҳлили мултиплексии мо барои IAV ва IBV хосият нишон дод ва патотипи вируси зукомро иҷозат дод.Натиҷаҳои санҷиши клиникӣ бо истифода аз намунаи тампончаи бинии 18 бемор ва 18 шахсони солим мувофиқати хубро дар шиддатнокии флуоресцент бо стандарти RT-PCR (коэффитсиентҳои Пирсон > 0,9) нишон медиҳанд.Натиҷаҳои санҷиши клиникӣ бо истифода аз намунаи тампончаи бинии 18 бемор ва 18 шахсони солим мувофиқати хубро дар шиддатнокии флуоресцент бо стандарти RT-PCR (коэффитсиентҳои Пирсон > 0,9) нишон медиҳанд.Результаты клинических испытании с использованием образца мазка аз носа аз 18 бемор ва 18 здоровых литсензияҳои пурқуввати флуорессенции стандартии OT-PCR (корэффициенти Пирсона > 0,9).Натиҷаҳои озмоишҳои клиникӣ бо истифода аз намунаи тампончаи бинии 18 бемор ва 18 шахсони солим мувофиқати хубро байни шиддатнокии флуорессенсияи стандартии RT-PCR (коэффициентҳои Пирсон > 0,9) нишон медиҳанд.0.9）…………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… Результаты клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков аз 18 бемор ва 18 нафар беморон ва 18 нафар беморон дар байни интенсивностии флуорессенции ва стандартной ОТ-ПЦР (коэффициент, Пиона >).Натиҷаҳои озмоишҳои клиникӣ бо истифода аз намунаҳои тампони бинии 18 бемор ва 18 шахсони солим мувофиқати хуби байни шиддатнокии флуоресцент ва стандарти RT-PCR (коэффисиенти Пирсон > 0,9) нишон доданд.Арзиши тахминии моддии дастгоҳи FAST-POCT тақрибан 1 доллари ИМА-ро ташкил медиҳад (Ҷадвали 1) ва онро метавон минбаъд бо истифода аз усулҳои истеҳсоли миқёси калон (масалан, қолаби сӯзандору) коҳиш дод.Дарвоқеъ, дастгоҳҳои POCT дар асоси FAST дорои тамоми хусусиятҳои зарурӣ мебошанд, ки аз ҷониби ТУТ таъйин шудаанд ва бо усулҳои нави озмоиши биохимиявӣ, аз қабили сикли гармии плазма44, иммунотазеҳҳои беқувват45 ва санҷишҳои функсионализатсияи нанокор46, ки асоси системаҳои POCT мебошанд, мувофиқанд.имкон.
Дар расм.1а сохтори платформаи FAST-POCT, ки аз чор камераи моеъ иборат аст, нишон медиҳад: камераи пеш аз нигоҳдорӣ, камераи омехта, камераи реаксия ва камераи партовҳо.Калиди назорати ҷараёни моеъ тарҳи FAST (иборат аз мембранаҳои эластикӣ, фишангҳо ва блокҳо) мебошад, ки дар камераи пеш аз нигоҳдорӣ ва камераи омехта ҷойгир аст.Ҳамчун як усули бо пневматикӣ фаъолшуда, тарҳи FAST назорати дақиқи ҷараёни моеъро, аз ҷумла гузариши пӯшида/кушода, миқдори ҳамаҷониба, баровардани моеъ аз рӯи талабот, кори боэътимод (масалан, ҳассосият ба ларзиши муҳити зист) ва нигоҳдории дарозмуддатро таъмин мекунад.Платформаи FAST-POCT аз чор қабат иборат аст: қабати пуштибонӣ, қабати плёнкаи эластикӣ, қабати плёнкаи пластикӣ ва қабати сарпӯш, тавре ки дар намуди васеъшуда дар расми 1b нишон дода шудааст (инчунин дар расмҳои иловагии S1 ва S2 ба таври муфассал нишон дода шудааст. ).Ҳама каналҳо ва камераҳои интиқоли моеъ (ба монанди камераҳои пеш аз нигоҳдорӣ ва реаксия) дар субстратҳои PLA (кислотаи полилактикӣ) ҷойгир карда шудаанд, ки аз 0,2 мм (қисмати бориктарин) то 5 мм ғафсӣ доранд.Маводи плёнкаи эластикӣ як PDMS-и ғафсии 300 мкм мебошад, ки ҳангоми татбиқи фишори ҳаво аз сабаби "ғафсӣ лоғар" ва модули пасти чандирии он (тақрибан 2,25 МПа47) ба осонӣ васеъ мешавад.Қабати плёнкаи полиэтиленӣ аз полиэтилентерефталат (ПЭТ) бо ғафсии 100 мкм сохта шудааст, то плёнкаи эластикиро аз деформатсияи аз ҳад зиёд аз фишори ҳаво муҳофизат кунад.Мувофиқи камераҳо, қабати субстрат фишангҳое дорад, ки ба қабати сарпӯш (аз PLA сохта шудааст) тавассути болгаҳо барои назорати ҷараёни моеъ пайваст карда шудаанд.Плёнкаи эластикӣ ба қабати пуштибонӣ бо истифода аз лентаи илтиёмии дутарафа (ARseal 90880) часпонида шуда, бо плёнкаи пластикӣ пӯшида шуд.Се қабат дар як субстрат бо истифода аз тарҳи T-clip дар қабати сарпӯш ҷамъ карда шуданд.Т-тазиқи байни ду по фосила дорад.Вақте ки клип ба чуқурӣ ворид карда шуд, ду по каме хам шуда, баъд ба ҳолати аввалаи худ баргаштанд ва ҳангоми гузаштан аз чуқурӣ сарпӯш ва пуштибонро сахт баста буданд (Расми иловагӣ S1).Пас аз чор қабат бо истифода аз пайвасткунакҳо ҷамъ карда мешаванд.
Диаграммаи схематикии платформа, ки қисмҳои гуногуни функсионалӣ ва хусусиятҳои FAST-ро тасвир мекунад.б Диаграммаи васеъшудаи платформаи FAST-POCT.в Сурати платформа дар паҳлӯи тангаи чоряк доллари ИМА.
Механизми кории платформаи FAST-POCT дар расми 2 нишон дода шудааст. Қисмҳои асосӣ блокҳо дар қабати асосӣ ва болгаҳо дар қабати сарпӯш мебошанд, ки ҳангоми ҷамъ кардани чор қабат бо истифода аз шакли T-шакл тарҳрезии интерференсияро ба вуҷуд меорад. .Ҳангоме ки фишори ҳаво ҷорӣ намешавад (расми 2а), мувофиқшавии интерференсия ҳалқаро хам мекунад ва деформатсия мекунад ва тавассути фишанг қувваи мӯҳр барои пахш кардани плёнкаи эластикӣ ба блок истифода мешавад ва моеъ дар холигоҳи мӯҳр муайян карда мешавад. ҳамчун давлати мӯҳр.Бояд гуфт, ки дар ин холат фишанг ба берун хам мешавад, ки дар намуди паҳлӯӣ дар расми 2а нишон дода шудааст.Вақте ки ҳаво дода мешавад (расми 2б), мембранаи эластикӣ ба берун ба сӯи сарпӯш васеъ мешавад ва фишангро ба боло тела медиҳад ва ҳамин тавр байни фишанг ва блок фосила мекушояд, то моеъ ба камераи навбатӣ ҷорӣ шавад, ки он ҳамчун ҳолати кушод муайян карда мешавад. .Пас аз баровардани фишори ҳаво, фишанг метавонад ба ҳолати аввалааш баргардад ва аз сабаби чандирии ҳалқа сахт боқӣ монад.Видеои ҳаракатҳои фишангҳо дар филми иловагии S1 оварда шудаанд.
A. Диаграммаи схематикӣ ва аксҳо ҳангоми пӯшида.Дар сурати набудани фишор фишанг мембранаро ба блок пахш мекунад ва моеъ мӯҳр мешавад.б Дар ҳолати хуб.Вақте ки фишор меоранд, мембрана васеъ мешавад ва фишангро боло тела медиҳад, бинобар ин канал кушода мешавад ва моеъ метавонад ҷорӣ шавад.в Андозаи хоси фишори критикиро муайян кунед.Андозаҳои характеристика дарозии фишанг (L), масофаи байни слайдер ва ҳалқа (л) ва ғафсии баромади фишанг (t) мебошанд.Fs қувваи фишурдакунӣ дар нуқтаи дроссел B. q сарбории яксон тақсимшуда ба фишанг мебошад.Tx* моменти аз ҷониби фишанги болга сохташударо ифода мекунад.Фишори интиқодӣ ин фишорест, ки барои баланд бардоштани фишанг ва ҷараёни моеъ зарур аст.г Натиҷаҳои назариявӣ ва таҷрибавии муносибати байни фишори муҳим ва андозаи элементҳо.n = 6 таҷрибаҳои мустақил гузаронида шуданд ва маълумот ҳамчун ± инҳирофи стандартӣ нишон дода шудаанд.Маълумоти хом ҳамчун файлҳои додаҳои хом пешниҳод карда мешаванд.
Барои тахлили вобастагии фишори критикии Pc модели аналитикие, ки дар асоси назарияи шуоъ асос ёфтааст, тартиб дода шудааст, ки дар он фосила ба параметрхои геометри кушода мешавад (масалан, L - дарозии фишанг, l - масофаи байни блок ва блок. ҳалқа, S фишанги аст Майдони тамос бо моеъ t ғафсӣ аз protrusion фишанги аст , тавре ки дар расми 2c нишон дода шудааст).Тавре ки дар Эзоҳҳои иловагӣ ва расми иловагии S3 муфассал оварда шудааст, фосила вақте кушода мешавад, ки \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), ки Fs моменти моменти аст \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) барои бартараф кардани қувваҳои марбут ба фишурдани интерференсия ва боиси хам шудани болга.Ҷавоби таҷрибавӣ ва модели аналитикӣ мувофиқати хубро нишон медиҳад (расми 2г), нишон медиҳад, ки фишори интиқодӣ Pc бо афзоиши t/l ва камшавии L зиёд мешавад, ки онро модели шуои классикӣ ба осонӣ шарҳ медиҳад, яъне моменти момент бо t /Lift меафзояд. .Ҳамин тариқ, таҳлили назариявии мо ба таври возеҳ нишон медиҳад, ки фишори муҳимро тавассути танзими дарозии фишанги L ва таносуби t/l самаранок идора кардан мумкин аст, ки барои тарҳрезии платформаи FAST-POCT заминаи муҳимро фароҳам меорад.
Платформаи FAST-POCT тақсимоти бисёрфунксионалиро таъмин мекунад (дар расми 3а бо воридкунӣ ва таҷриба нишон дода шудааст), ки муҳимтарин хусусияти POCT бомуваффақият аст, ки дар он моеъҳо метавонанд дар ҳама самт ва бо ҳама гуна тартиб (каскад, ҳамзамон, пайдарпай) ё бисёрканалҳои интихобӣ ҷорӣ шаванд. тақсим кардан.- функсияи миқдор.Дар расм.3a(i) режими миқдорбандии каскадро нишон медиҳад, ки дар он ду ё зиёда камераҳо бо истифода аз блокҳо барои ҷудо кардани реактивҳои гуногун ва фишанги назорат кардани ҳолати кушода ва пӯшида каскад карда мешаванд.Ҳангоми фишор овардан, моеъ аз боло ба камераи поёнӣ ба таври каскадӣ ҷорӣ мешавад.Бояд қайд кард, ки камераҳои каскадро бо маводи кимиёвии тар ё кимиёвии хушк, ба монанди хокаҳои лиофилизатсияшуда пур кардан мумкин аст.Дар тачриба дар расми 3а(и) ранги сурхи камераи боло бо хокаи ранги кабуд (сульфати мис) ба камераи дуюм равон мешавад ва хангоми ба камераи поён расидан ранги кабуди тира мешавад.Он инчунин фишори назоратиро барои моеъи насосӣ нишон медиҳад.Ба ҳамин монанд, вақте ки як фишанг ба ду камера пайваст карда мешавад, он ба ҳолати сӯзандоруи ҳамзамон табдил меёбад, ки дар расм нишон дода шудааст.3a (ii), ки дар он моеъ метавонад дар ду ё зиёда камераҳо ҳангоми фишор ба таври яксон тақсим карда шавад.Азбаски фишори интиқодӣ аз дарозии фишанг вобаста аст, дарозии фишангро метавон танзим кард, то намунаи пайдарпайи сӯзандоруро тавре ки дар расм нишон дода шудааст, ба даст орад.3а(iii).Як фишанги дароз (бо фишори критикӣ Pc_long) ба камераи В ва фишанги кӯтоҳ (бо фишори критикӣ Pc_short > Pc_long) ба камераи А пайваст карда шуд. Вақте ки фишори P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) истифода мешуд, танҳо моеъ дар ранги сурх метавонад ба камераи В ҷорӣ шавад ва вақте ки фишор то P2 (> Pc_short) зиёд шуд, моеъи кабуд метавонад ба камераи А ҷорӣ шавад. Ин режими тазриқи пайдарпай ба моеъҳои гуногун, ки ба камераҳои алоқаманди онҳо бо пайдарпай интиқол меёбанд, дахл дорад, ки барои бомуваффақияти POCT муҳим аст. дастгоҳ.Як фишанги дароз (бо фишори критикӣ Pc_long) ба камераи В ва фишанги кӯтоҳ (бо фишори критикӣ Pc_short > Pc_long) ба камераи А пайваст карда шуд. Вақте ки фишори P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) истифода мешуд, танҳо моеъ дар ранги сурх метавонад ба камераи В ҷорӣ шавад ва вақте ки фишор то P2 (> Pc_short) зиёд шуд, моеъи кабуд метавонад ба камераи А ҷорӣ шавад. Ин режими тазриқи пайдарпай ба моеъҳои гуногун, ки ба камераҳои алоқаманди онҳо бо пайдарпай интиқол меёбанд, дахл дорад, ки барои бомуваффақияти POCT муҳим аст. дастгоҳ.Длыный рычам Мерой а. Прит противӣ Камеру B, и когда давление бо увеличено то P2 (> Pc_short), синяя жидкость метавонад течь дар камерау A. Этот режими баъд аз он ки ба таври васеъ истифода бурда мешавад, пас аз он камераро решакан мекунад ной POCT.Ба камераи В фишанги дароз (бо фишори критикӣ Pc_long) пайваст карда шуд ва фишанги кӯтоҳ (бо фишори критикӣ Pc_short > Pc_long) ба камераи А пайваст карда шуд. Вақте ки фишори P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) ба кор бурда мешавад, танҳо моеъ равшан карда шуд. ранги сурх метавонад ба камераи В ҷорӣ шавад ва вақте ки фишор то P2 (> Pc_short) зиёд шуд, моеъи кабуд метавонад ба камераи А ҷорӣ шавад. Ин режими сӯзандоруи пайдарпай ба моеъҳои гуногун ба таври пайдарпай ба камераҳои мувофиқ интиқол дода мешавад, ки ин муҳим аст барои муваффакияти POCT.дастгоҳ. Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камераой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_short > Pc_long) соединен с камераой A.Дасти дароз (фишори критикӣ Pc_long) ба камераи В ва дасти кӯтоҳ (фишори интиқодӣ Pc_short > Pc_long) ба камераи А пайваст карда мешавад.Приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) дар камераи B метавонад ҷойгир карда шавад, то увеличении давления то P2 (> Pc_short) дар камераи A метавонад синяя жидкостиро ҷойгир кунад.Вақте ки фишори P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) татбиқ карда мешавад, танҳо моеъи сурх метавонад ба камераи В ворид шавад ва вақте ки фишор ба P2 (> Pc_short) зиёд мешавад, моеъи кабуд метавонад ба камераи А ворид шавад. Ин режими сӯзандоруи пайдарпай барои интиқоли пайдарпайи сӯзандору мувофиқ аст. моеъҳои гуногун ба камераҳои мувофиқ, ки барои кори бомуваффақияти дастгоҳи POCT муҳим аст.Дар расми 3а(iv) режими интихобии тазриқӣ нишон дода шудааст, ки дар он камераи асосӣ як кӯтоҳ (бо фишори критикӣ Pc_short) ва фишанги дароз (бо фишори критикӣ Pc_long < Pc_short) мавҷуд аст, ки мутаносибан ба камераи А ва камераи В пайваст карда шудаанд. ба канали дигари хаво, ки ба камераи В пайваст аст. Барои ба камераи А гузарондани моеъ аввал дар як вакт фишори P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) ва P2 (P2 > P1) бо P1 + P2 > Pc_short дода шуд.Дар расми 3а(iv) режими интихобии тазриқӣ нишон дода шудааст, ки дар он камераи асосӣ як кӯтоҳ (бо фишори критикӣ Pc_short) ва фишанги дароз (бо фишори критикӣ Pc_long < Pc_short) мавҷуд аст, ки мутаносибан ба камераи А ва камераи В пайваст карда шудаанд. ба канали дигари хаво, ки ба камераи В пайваст аст. Барои ба камераи А гузарондани моеъ аввал дар як вакт фишори P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) ва P2 (P2 > P1) бо P1 + P2 > Pc_short дода шуд.Дар расм.3а(iv) показан селективного впрыска, при котором основная камера имела короткий (с критическим давлением Pc_short) ва длинный рычаг (с критическим давлением Pc_long < Pc_short), ки бо камераи назорати камеравӣ аз ҷониби камераҳои назоратӣ.3а(iv) режими интихобии инъекцияро нишон медихад, ки дар он камераи асосй кутох (бо фишори критикии Pc_short) ва фишанги дароз (бо фишори критикии Pc_long < Pc_short) дошт, ки ба таври илова ба камераи А ва камераи В пайваст карда шудаанд.к другому воздушному каналу, соединенному с камераой B. Чтобы сначала передать жидкость в камерау A, к устройству одновременно прикладывали давление P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) ва P2 (P2 > P1), где P1 + P2 Pc >.ба канали дигари ҳаво, ки ба камераи В пайваст аст. Барои аввалин бор интиқол додани моеъ ба камераи А, фишорҳои P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) ва P2 (P2 > P1) дар як вақт ба дастгоҳ дода шуданд, ки дар он P1 + P2 > Pc_short. 3а(iv) показан селективного впрыска, когда основная камера имеет короткий стержень (с критическим давлением Pc_short) ва длинный стержень (с критическим давлением Pc_long < Pc_short), соединенные ба камераҳои камеравӣ, ки бо камераҳои гуногун истифода мешавад каналу, подключенному к комнате Б.3a(iv) режими интихобии сӯзандоруро нишон медиҳад, вақте ки камераи асосӣ дорои пояи кӯтоҳ (фишори интиқодӣ Pc_short) ва пояи дароз (фишори интиқодӣ Pc_long < Pc_short) ба камераи А ва камераи B ва илова ба гузариши дигари ҳаво, ба ҳуҷраи B пайваст.Ҳамин тариқ, P2 моеъро аз ворид шудан ба камераи В пешгирӣ мекунад;дар айни замон, фишори умумии P1 + P2 аз фишори критикӣ зиёд шуд, то фишанги кӯтоҳтари ба камераи А пайвастшударо фаъол созад, то ҷараёни моеъ ба камераи А имкон диҳад. Сипас, вақте ки камераи B пур карда мешуд, мо танҳо лозим аст, ки P1-ро истифода барем (Pc_long < P1 < Pc_short) дар камераи асосӣ барои фаъол кардани фишанги дароз ва ба камераи В ҷорӣ шудани моеъ имкон медиҳад. Аз вақти t = 3 с то 9 с ба таври равшан мушоҳида кардан мумкин аст, ки моеъ дар камераи А доимӣ боқӣ монда, дар ҳоле ки он дар камера зиёд мешуд. В, вақте ки фишори P1 татбиқ карда шуд.дар айни замон, фишори умумии P1 + P2 аз фишори критикӣ зиёд шуд, то фишанги кӯтоҳтари ба камераи А пайвастшударо фаъол созад, то ҷараёни моеъ ба камераи А имкон диҳад. Сипас, вақте ки камераи B пур карда мешуд, мо танҳо лозим аст, ки P1-ро истифода барем (Pc_long < P1 < Pc_short) дар камераи асосӣ барои фаъол кардани фишанги дароз ва ба камераи В ҷорӣ шудани моеъ имкон медиҳад. Аз вақти t = 3 с то 9 с ба таври равшан мушоҳида кардан мумкин аст, ки моеъ дар камераи А доимӣ боқӣ монда, дар ҳоле ки он дар камера зиёд мешуд. В, вақте ки фишори P1 татбиқ карда шуд.Между сем, обще даавенение P1 + P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 P2 PONTICHECEEEEEEENENETY Рычагус, Содикый Овволить Жидкости теху А. Затомингь ) дар асоси камера, шумо метавонед фаъол созед длинный рычаг ва дать жидкости техь дар камерау B. Можно ясно наблюдать, то дар давраи аз t = 3 то 9 с ҷидкость дар камерае A мустақар шуда, дар давоми время как дар камерае уваст.Дар ҳамин ҳол, фишори умумии P1 + P2 аз фишори критикӣ барои фаъол кардани фишанги кӯтоҳтаре, ки ба камераи А пайваст шудааст, зиёд шуд, то моеъ ба камераи А ворид шавад. Пас, вақте ки камераи B бояд пур карда шавад, мо танҳо лозим аст, ки P1 (Pc_long < P1) -ро истифода барем. < Pc_short ) дар камераи асосӣ барои фаъол кардани фишанги дароз ва ҷорӣ шудани моеъ ба камераи В. Ба таври равшан мушоҳида кардан мумкин аст, ки дар байни t = 3 с то 9 с моеъ дар камераи А доимӣ боқӣ монда, дар камера он зиёд мешавад.B вақте ки фишори P1 истифода мешавад.Дар айни замон, фишори умумии P1 + P2 аз фишори критикӣ зиёд шуда, фишанги кӯтоҳтари васлкунандаи камераи А-ро ба кор андохта, имкон медиҳад, ки моеъ ба камераи А ворид шавад.Вақте ки вақти пур кардани камераи А расидааст, мо танҳо P1 -ро дар палатаи асосӣ ва P2 -ро дар камераи дуюм истифода мебарем.Бо ин роҳ, рафтори ҷараёнро метавон ба таври интихобӣ байни камераҳои A ва B иваз кард. Рафтори ҷараёни чаҳор намуди тақсимоти бисёрфунксионалиро дар филми иловагии S2 пайдо кардан мумкин аст.
a Намоиши таъиноти бисёрфунксионалӣ, яъне (i) каскадӣ, (ii) ҳамзамон, (iii) пайдарпай ва (iv) супориши интихобӣ.Каҷҳо ҷараёни кор ва параметрҳои ин чаҳор намуди тақсимотро намояндагӣ мекунанд.б Натиҷаҳои санҷишҳои нигоҳдории дарозмуддат дар оби деионизатсияшуда ва этанол.n = 5 таҷрибаҳои мустақил анҷом дода шуданд ва маълумот ҳамчун ± sd c нишон дода шудаанд.Намоишҳои санҷиши устуворӣ вақте ки дастгоҳи FAST ва клапанҳои капиллярӣ (CV) дар (i) статикӣ ва (ii) ларзиш буданд.(iii) Ҳаҷм нисбат ба вақт барои дастгоҳҳои FAST ва CV дар басомадҳои гуногуни кунҷӣ.d Нашри натиҷаҳои санҷиш мувофиқи талабот барои (i) дастгоҳи FAST ва (ii) дастгоҳи CV.(iii) Муносибати байни ҳаҷм ва вақт барои дастгоҳҳои FAST ва CV бо истифода аз режими фишори фосилавӣ.Ҳама барҳои миқёс, 1 см.Маълумоти хом ҳамчун файлҳои маълумотҳои хом пешниҳод карда мешаванд.
Нигоҳдории дарозмуддати реагентҳо боз як хусусияти муҳими дастгоҳи бомуваффақияти POCT мебошад, ки ба кормандони бетаҷриба имкон медиҳад, ки реагентҳои сершуморро идора кунанд.Дар ҳоле ки бисёр технологияҳо потенсиали худро барои нигоҳдории дарозмуддат нишон додаанд (масалан, 35 микродиспенсер, 48 бастаи блистер ва 49 бастаи чӯб), барои ҷойгир кардани баста утоқи махсуси қабулкунӣ лозим аст, ки хароҷот ва мураккабиро зиёд мекунад;гайр аз ин, ин механизмхои нигахдорй барои аз руи талабот пошидани дорухо имкон намедиханд ва боиси исроф шудани реагентхо аз сабаби бокимондахои бастабандй мегарданд.Қобилияти нигоҳдории дарозмуддат тавассути гузаронидани санҷиши босуръати ҳаёт бо истифода аз маводи PMMA бо CNC коркардшуда аз сабаби ноҳамворӣ ва муқовимат ба гузариши газ тасдиқ карда шуд (Расми иловагии S5).Дастгоҳи санҷишӣ бо оби деионизатсияшуда (оби деионизатсияшуда) ва 70% этанол (симулятсияи реагентҳои идоранашаванда) дар ҳарорати 65 ° C барои 9 рӯз пур карда шуд.Ҳам оби деионизатсияшуда ва ҳам этанол бо истифода аз фолгаи алюминӣ барои бастани дастрасӣ аз боло нигоҳ дошта шуданд.Муодилаи Аррениус ва энергияи фаъолсозии воридшавӣ дар адабиёт50,51 барои ҳисоб кардани эквиваленти вақти воқеӣ истифода шудааст.Дар расм.Дар расми 3b натиҷаҳои миёнаи талафоти вазн барои 5 намуна, ки дар 65°C дар тӯли 9 рӯз нигоҳ дошта шудаанд, ба 0,30% барои оби деионизатсияшуда ва 0,72% барои 70% этанол дар тӯли 2 сол дар 23°C нишон медиҳад.
Дар расм.3c санҷиши ларзишро нишон медиҳад.Азбаски клапани капиллярӣ (CV) маъмултарин усули коркарди моеъ дар байни дастгоҳҳои мавҷудаи POCT28,29 мебошад, барои муқоиса дастгоҳи CV-и паҳнои 300 мкм ва чуқурии 200 мкм истифода шудааст.Мумкин аст, ки вақте ки ҳарду дастгоҳ доимӣ мемонанд, моеъ дар платформаи FAST-POCT ва моеъи дастгоҳи CV аз сабаби васеъшавии ногаҳонии канал баста мешаванд, ки қувваҳои капилляриро коҳиш медиҳад.Аммо, бо зиёд шудани басомади кунҷии вибратори орбиталӣ, моеъ дар платформаи FAST-POCT мӯҳр боқӣ мемонад, аммо моеъ дар дастгоҳи CV ба камераи поёнӣ ҷорӣ мешавад (инчунин нигаред ба Филми иловагии S3).Ин аз он шаҳодат медиҳад, ки болгаҳои деформатсияшавандаи платформаи FAST-POCT метавонанд ба модул қувваи механикии қавӣ истифода баранд, то моеъро дар камера маҳкам пӯшанд.Аммо, дар дастгоҳҳои CV, моеъ аз сабаби мувозинат байни фазаҳои сахт, ҳаво ва моеъ нигоҳ дошта мешавад, ки ноустувориро ба вуҷуд меорад ва ларзишҳо метавонанд мувозинатро вайрон кунанд ва боиси рафтори ғайричашмдошти ҷараён гардад.Бартарии платформаи FAST-POCT дар он аст, ки он функсияҳои боэътимодро таъмин мекунад ва аз нокомиҳо дар ҳузури ларзишҳо, ки одатан ҳангоми интиқол ва истифода рух медиҳанд, пешгирӣ мекунад.
Хусусияти дигари муҳими платформаи FAST-POCT ин нашри дархости он мебошад, ки талаботи калидӣ барои таҳлили миқдорӣ мебошад.Дар расм.3d баровардани дархости платформаи FAST-POCT ва дастгоҳи CV-ро муқоиса мекунад.Аз анҷир.3d(iii) мо мебинем, ки дастгоҳи FAST ба сигнали фишор зуд ҷавоб медиҳад.Ҳангоми фишор ба платформаи FAST-POCT, моеъ ҷорӣ шуд, вақте ки фишор озод шуд, ҷараён фавран қатъ шуд (расми 3d(i)).Ин амалро бо зуд баргардонидани эластикии болга, ки фишангро ба блок бармегардонад ва камераро мебандад, шарҳ додан мумкин аст.Бо вуҷуди ин, моеъ дар дастгоҳи CV ҷараёнро идома дод ва дар ниҳоят ҳаҷми ғайричашмдошти моеъро пас аз баровардани фишор тақрибан 100 мкл ба вуҷуд овард (Расми 3d(ii) ва Филми иловагии S4).Инро метавон бо аз байн рафтани таъсири пиннинги капиллярӣ пас аз тар кардани пурраи CV пас аз тазриқи аввал шарҳ дод.
Қобилияти коркарди моеъҳои намнокӣ ва часпакиашон гуногун дар як дастгоҳ барои барномаҳои POCT мушкил боқӣ мемонад.Намнокии паст метавонад боиси ихроҷ ё дигар рафтори ғайричашмдошти ҷараён дар каналҳо гардад ва таҷҳизоти ёрирасон ба монанди миксерҳои гирдоби, центрифугаҳо ва филтрҳо аксар вақт барои тайёр кардани моеъҳои часпак 52 лозиманд.Мо муносибати байни фишори критикӣ ва хосиятҳои моеъро (бо доираи васеи намнокӣ ва часпак) санҷидем.Натиҷаҳо дар ҷадвали 1 ва Видео S5 нишон дода шудаанд.Дидан мумкин аст, ки моеъҳои дорои намнокӣ ва часпакиашон гуногунро дар камера мӯҳр кардан мумкин аст ва ҳангоми фишор додан ҳатто моеъҳои часпакиашон то 5500 cP ба камераи ҳамшафат интиқол дода мешаванд, ки ин имкон медиҳад, ки намунаҳои дорои часпакҳои баланд муайян карда шаванд. часпак (яъне балғам, намунаи хеле часпак, ки барои ташхиси бемориҳои роҳи нафас истифода мешавад).
Бо омезиши дастгоҳҳои бисёрфунксионалии дар боло номбаршуда, метавон доираи васеи дастгоҳҳои POCT-ро дар асоси FAST таҳия кард.Намуна дар расми 1 нишон дода шудааст. Корхона дорои камераи пеш аз нигоҳдорӣ, камераи омехта, камераи реаксия ва камераи партовҳо мебошад.Реактивҳоро метавон дар камераи нигоҳдории пешакӣ барои муддати тӯлонӣ нигоҳ дошта, сипас ба камераи омехта партофтан мумкин аст.Бо фишори дуруст, реактивҳои омехтаро интихобан ба камераи партовҳо ё камераи реаксия интиқол додан мумкин аст.
Азбаски муайянкунии PCR стандарти тиллоӣ барои ошкор кардани патогенҳо ба монанди H1N1 ва COVID-19 мебошад ва қадамҳои сершумори реаксияро дар бар мегирад, мо платформаи FAST-POCT-ро барои муайян кардани PCR ҳамчун барнома истифода мебарем.Дар расм.Дар расм 4 раванди санҷиши PCR бо истифода аз платформаи FAST-POCT нишон дода шудааст.Аввалан, реагенти элюткунанда, реагенти микробҳои магнитӣ, маҳлули шустани А ва маҳлули шустани W мутаносибан ба камераҳои пеш аз нигоҳдории E, M, W1 ва W2 пипета карда шуданд.Марҳилаҳои адсорбсияи РНК дар расм нишон дода шудаанд.4а ва инҳоянд: (1) вақте ки фишори P1 (=0,26 бар) истифода мешавад, намуна ба камераи M ҳаракат мекунад ва ба камераи омехта холӣ мешавад.(2) Фишори ҳаво P2 (= 0,12 бар) тавассути бандари А, ки ба поёни камераи омехта пайваст шудааст, дода мешавад.Ҳарчанд як қатор усулҳои омехта иқтидори худро дар омехта кардани моеъҳо дар платформаҳои POCT нишон доданд (масалан, омехтаи серпентинӣ 53, омехтаи тасодуфӣ 54 ва омехтаи партия 55), самаранокӣ ва самаранокии омехтаи онҳо то ҳол қаноатбахш нест.Он усули омехтаи ҳубобро қабул мекунад, ки дар он ҳаво ба қаъри камераи омехта ворид карда мешавад, то дар моеъ футурҳо ба вуҷуд орад, ки пас аз он гирдоби пурқувват метавонад дар тӯли сонияҳо омехтаи комилро ба даст орад.Таҷрибаҳои омехтаи ҳубобӣ гузаронида шуданд ва натиҷаҳо дар расми иловагии S6 оварда шудаанд.Мумкин аст, ки ҳангоми фишори 0,10 бар, омехтаи пурра тақрибан 8 сонияро мегирад.Бо баланд бардоштани фишор то 0,20 бар, омехтаи пурра тақрибан дар 2 сония ба даст меояд.Усулҳои ҳисобкунии самаранокии омехта дар бахши Усулҳо оварда шудаанд.(3) Барои истихроҷи маҳтобакҳо магнити рубидииро истифода баред, сипас ба P3 (= 0,17 бар) тавассути бандари P фишор диҳед, то реагентҳоро ба камераи партов интиқол диҳед.Дар расм.Дар расми 4b,c қадамҳои шустушӯй барои тоза кардани ифлосиҳо аз намуна чунин нишон дода шудааст: (1) Маҳлули шустани А аз камераи W1 ба камераи омехтакунии фишор P1 рехта мешавад.(2) Сипас раванди омехта кардани ҳубобро иҷро кунед.(3) Маҳлули шустани А ба камераи моеъи партовҳо интиқол дода мешавад ва микробчаҳои камераи омехта тавассути магнит кашида мешаванд.Шустани W (расми 4в) ба шустани А (расми 4б) монанд буд.Кайд кардан лозим аст, ки хар як шустани А ва В ду маротиба ичро карда мешавад.Тасвири 4d қадамҳои элюциониро барои аз байн бурдани РНК нишон медиҳад;марҳилаҳои ҷорӣ кардани элюсия ва омехта бо қадамҳои адсорбсияи РНК ва шустани дар боло тавсифшуда якхелаанд.Вақте ки реагентҳои элютсионӣ ба камераи реаксияи ПТР таҳти фишорҳои P3 ва P4 (=0,23 бар) интиқол дода мешаванд, фишори муҳим барои мӯҳр кардани бозуи камераи реаксияи ПТР мерасад.Ба ҳамин монанд, фишори P4 инчунин барои мӯҳр задани гузаргоҳ ба камераи партовҳо кӯмак мекунад.Ҳамин тариқ, ҳама реагентҳои элюционӣ дар байни чор камераи реаксияи ПТР барои оғози реаксияҳои мултиплексии ПТР баробар тақсим карда шуданд.Тартиби дар боло зикршуда дар Филми иловагии S6 оварда шудааст.
Дар марҳилаи адсорбсияи РНК, намуна ба вуруди M ворид карда мешавад ва ба камераи омехта бо маҳлули қаблан нигоҳ дошташуда ворид карда мешавад.Пас аз омехта ва хориҷ кардани гранулаҳо, реактивҳо ба камераи партовҳо тақсим карда мешаванд.қадамҳои шустани b ва c, реагентҳои гуногуни шустани қаблан нигоҳ дошташударо ба камераи омехта ворид кунед ва пас аз омехта ва хориҷ кардани пораҳо реагентҳоро ба камераи моеъи партов интиқол диҳед.d Марҳилаи элюсия: Пас аз ворид кардани реагентҳои элюционӣ, омехта ва экстраксияи маҳлул, реагентҳо ба камераи реаксияи PCR интиқол дода мешаванд.Каҷҳо ҷараёни кор ва параметрҳои марбути марҳилаҳои гуногунро нишон медиҳанд.Фишор ин фишорест, ки тавассути камераҳои алоҳида гузаронида мешавад.Ҳаҷм ҳаҷми моеъ дар камераи омехта мебошад.Ҳама барҳои миқёс 1 см мебошанд.Маълумоти хом ҳамчун файлҳои маълумотҳои хом пешниҳод карда мешаванд.
Тартиби санҷиши PCR анҷом дода шуд ва Дар расми S7 профилҳои гармидиҳӣ, аз ҷумла 20 дақиқаи вақти транскрипсияи баръакс ва 60 дақиқаи давраи гардиши гармӣ (95 ва 60 °C), бо як давраи гармидиҳӣ 90 сония (Филми иловагӣ S7) пешниҳод шудааст..FAST-POCT барои анҷом додани як давраи гармӣ (90 сония) нисбат ба RT-PCR анъанавӣ (180 сония барои як давраи гармӣ) вақти камтарро талаб мекунад.Инро метавон бо майдони баланди сатҳ ба таносуби ҳаҷм ва инерсияи пасти гармии камераи реаксияи микро-ПТР шарҳ дод.Сатҳи камера 96,6 мм2 ва ҳаҷми камера 25 мм3 буда, таносуби сатҳ ба ҳаҷмро тақрибан 3,86 ташкил медиҳад.Тавре ки дар расми иловагии S10 дида мешавад, майдони санҷиши PCR-и платформаи мо дар панели қафо чуқурӣ дорад, ки поёни камераи PCR-ро 200 мкм ғафсӣ мекунад.Ба сатҳи гармидиҳии контролери ҳарорат як қабати эластикии гармидиҳӣ часпонида шудааст, ки алоқаи зич бо пушти қуттии санҷиширо таъмин мекунад.Ин инерсияи гармии платформаро коҳиш медиҳад ва самаранокии гармидиҳӣ/ хунуккуниро беҳтар мекунад.Ҳангоми гардиши гармӣ, парафини дар платформа ҷойгиршуда об мешавад ва ба камераи реаксияи PCR ҷорӣ мешавад ва ҳамчун пломба барои пешгирии бухоршавии реагент ва ифлосшавии муҳити зист амал мекунад (ниг. Филми иловагӣ S8).
Ҳама равандҳои муайянкунии PCR, ки дар боло тавсиф шудаанд, бо истифода аз асбоби фармоишии FAST-POCT, ки аз як воҳиди танзими фишори барномарезишуда, воҳиди истихроҷи магнитӣ, воҳиди назорати ҳарорат ва воҳиди сабт ва коркарди сигналҳои флуоресцентӣ иборат аст, пурра автоматӣ карда шуданд.Бояд қайд кард, ки мо платформаи FAST-POCT-ро барои ҷудокунии РНК истифода кардем ва сипас намунаҳои истихроҷшудаи РНК-ро барои реаксияҳои PCR бо истифода аз системаи FAST-POCT ва системаи PCR мизи корӣ барои муқоиса истифода бурдем.Натиҷаҳо тақрибан ҳамон тавре буданд, ки дар расми иловагии S8 нишон дода шудааст.Оператор вазифаи оддиро ичро мекунад: намунаро ба камераи М ворид мекунад ва платформаро ба асбоб мегузорад.Натиҷаҳои санҷиши миқдорӣ тақрибан дар 82 дақиқа дастрас мешаванд.Маълумоти муфассалро дар бораи асбобҳои FAST-POCT дар расми иловагӣ пайдо кардан мумкин аст.C9, C10 ва C11.
Зукоме, ки аз вирусҳои зукоми A (IAV), B (IBV), C (ICV) ва D (IDV) ба вуҷуд омадааст, як падидаи маъмули ҷаҳонӣ мебошад.Аз инҳо, IAV ва IBV барои ҳолатҳои вазнинтарин ва эпидемияҳои мавсимӣ масъуланд, ки 5-15% аҳолии ҷаҳонро сироят карда, 3-5 миллион ҳолати вазнинро ба вуҷуд меоранд ва ҳамасола боиси марги 290,000-650,000 мешаванд.Бемориҳои роҳҳои нафас 56,57.Ташхиси барвақти IAV ва IB барои коҳиш додани беморӣ ва сарбории иқтисодии алоқаманд муҳим аст.Дар байни усулҳои мавҷудаи ташхис, реаксияи занҷири транскриптази полимеразии баръакс (RT-PCR) ҳассостарин, мушаххас ва дақиқтарин (>99%) ҳисобида мешавад58,59.Дар байни усулҳои мавҷудаи ташхис, реаксияи занҷири транскриптази полимеразии баръакс (RT-PCR) ҳассостарин, мушаххас ва дақиқтарин (>99%) ҳисобида мешавад58,59.Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция бо обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считается наиболее чувствительной, специфичной ва точной (> 99%)58,59.Дар байни усулҳои мавҷудаи ташхис реаксияи занҷири транскриптазавии баръакс (RT-PCR) ҳассостарин, мушаххас ва дақиқтарин (> 99%) маҳсуб мешавад58,59. Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция бо обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считается наиболее чувствительной, специфичной ва точной (>99%)58,59.Аз усулҳои мавҷудаи ташхис реаксияи занҷири транскриптазавии баръакс (RT-PCR) ҳассостарин, мушаххас ва дақиқтарин (>99%) маҳсуб мешавад58,59.Бо вуҷуди ин, усулҳои анъанавии RT-PCR пиптинги такрорӣ, омехта кардан, тақсим кардан ва интиқол додани моеъро талаб мекунанд ва истифодаи онҳоро аз ҷониби мутахассисон дар муҳити маҳдуди захираҳо маҳдуд мекунанд.Дар ин ҷо платформаи FAST-POCT барои муайянкунии PCR-и IAV ва IBV мутаносибан барои ба даст овардани лимити поёнии ошкор (LOD) истифода мешуд.Илова бар ин, IAV ва IBV барои табъиз байни патотипҳои гуногун дар байни намудҳо мултиплекс карда шудаанд, ки платформаи ояндадор барои таҳлили генетикӣ ва қобилияти табобати дақиқи бемориро фароҳам меорад.
Дар расм.Дар расм 5а натиҷаҳои санҷиши HAV PCR бо истифода аз 150 мкл РНК вирусии тозашуда ҳамчун намуна нишон дода шудааст.Дар расм.5a(i) нишон медиҳад, ки дар консентратсияи HAV 106 нусха/мл, шиддатнокии флуорессенсия (ΔRn) метавонад ба 0,830 мерасад ва вақте ки консентратсияи он то 102 нусха/мл кам мешавад, ΔRn то ҳол метавонад ба 0,365 мерасад, ки ин ба баландтар аз он мувофиқат мекунад. аз гурӯҳи назорати манфии холӣ (0,002), тақрибан 100 маротиба зиёдтар аст.Барои миқдор дар асоси шаш таҷрибаҳои мустақил, каҷи калибрченкунии хатӣ байни консентратсияи лог ва ҳадди давра (Ct)-и IAV (расми 5a(ii)), R2 = 0,993, аз 102-106 нусха/мл тавлид карда шуд.натиҷаҳо бо усулҳои анъанавии RT-PCR мувофиқати хуб доранд.Дар расм.5a(iii) тасвирҳои флуоресцентии натиҷаҳои санҷишро пас аз 40 давраи платформаи FAST-POCT нишон медиҳад.Мо дарёфтем, ки платформаи FAST-POCT метавонад HAV-ро то 102 нусха/мл муайян кунад.Бо вуҷуди ин, усули анъанавӣ арзиши Ct дар 102 нусха/мл надорад, ки онро LOD тақрибан 103 нусха/мл месозад.Мо фарзия кардем, ки ин метавонад аз сабаби самаранокии баланди омехтаи ҳубобӣ бошад.Таҷрибаҳои санҷиши ПТР дар РНК-и тозашуда барои арзёбии усулҳои гуногуни омехтакунӣ, аз ҷумла омехтаи ларзиш (ҳамон усули омехта бо амалиёти анъанавии RT-PCR), омехтакунии шиша (ин усул, 3 сония дар 0,12 бар) ва омехта накардан ҳамчун гурӯҳи назоратӣ гузаронида шуданд. ..Натиҷаҳоро дар расми иловагии S12 пайдо кардан мумкин аст.Дидан мумкин аст, ки дар консентратсияи баландтари РНК (106 нусха/мл), арзишҳои Ct-и усулҳои гуногуни омехта тақрибан бо омехтаи ҳубобӣ баробаранд.Вақте ки консентратсияи РНК то 102 нусха/мл паст шуд, омехтаи ларзиш ва назорат қимати Ct надоштанд, дар ҳоле ки усули омехтаи ҳубобӣ то ҳол арзиши Ct-ро 36,9 дод, ки он аз ҳадди Ct аз 38 камтар буд. Натиҷаҳо хусусияти омехтаи бартаридоштаро нишон медиҳанд. vesicles, ки дар дигар адабиётҳо низ нишон дода шудаанд, ки ин инчунин метавонад фаҳмонад, ки чаро ҳассосияти платформаи FAST-POCT нисбат ба анъанавии RT-PCR каме баландтар аст.Дар расм.5b натиҷаҳои таҳлили ПТР-и намунаҳои тозашудаи РНК-и IBV-ро аз 101 то 106 нусха/мл нишон медиҳад.Натиҷаҳо ба санҷиши IAV монанд буданд, ки ба R2 = 0,994 ва LOD 102 нусха/мл ноил шуданд.
таҳлили PCR-и вируси зукоми А (IAV) бо консентратсияи IAV аз 106 то 101 нусха/мл бо истифода аз буфери TE ҳамчун назорати манфӣ (NC).(i) Каҷи флуорессенси вақти воқеӣ.(ii) Каҷи калибрченкунии хатӣ байни консентратсияи логарифмии IAV RNA ва ҳадди давра (Ct) барои усулҳои санҷиши FAST ва анъанавӣ.(iii) тасвири флуоресцентии IAV FAST-POCT пас аз 40 давра.б, муайянкунии PCR-и вируси зукоми В (IBV) бо (i) спектри флуорессенси вақти воқеӣ.(ii) Каҷи калибрченкунии хатӣ ва (iii) тасвири флуорессенси FAST-POCT IBV пас аз 40 давра.Маҳдудияти поёнии ошкор (LOD) барои IAV ва IBV бо истифода аз платформаи FAST-POCT 102 нусха/мл буд, ки нисбат ба усулҳои маъмулӣ (103 нусха/мл) камтар аст.c Натиҷаҳои санҷиши мултиплекс барои IAV ва IBV.GAPDH ҳамчун назорати мусбӣ ва буфери TE ҳамчун назорати манфӣ барои пешгирии ифлосшавии эҳтимолӣ ва тақвияти замина истифода шуд.Чор намуди намунаро метавон фарқ кард: (1) Намунаҳои танҳо манфии GAPDH («IAV-/IBV-»);(2) сирояти IAV (“IAV+/IBV-”) бо IAV ва GAPDH;(3) сирояти IBV (“IAV-/IBV+”) бо IBV ва GAPDH;(4) сирояти IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) бо IAV, IBV ва GAPDH.Хати нуқта хати остонаро ифода мекунад.n = 6 таҷрибаҳои мустақили биологӣ анҷом дода шуданд, маълумот ҳамчун ± инҳироф стандартӣ нишон дода шудааст.Маълумоти хом ҳамчун файлҳои додаҳои хом пешниҳод карда мешаванд.
Дар расм.5c натиҷаҳои санҷиши мултиплексиро барои IAV/IBV нишон медиҳад.Дар ин ҷо, лизати вирус ҳамчун маҳлули намунавӣ ба ҷои РНК-и тозашуда истифода шуд ва чаҳор праймер барои IAV, IBV, GAPDH (назорати мусбӣ) ва буфери TE (назорати манфӣ) ба чаҳор камераи гуногуни реаксияи платформаи FAST-POCT илова карда шуд.Дар ин ҷо назорати мусбӣ ва манфӣ барои пешгирии ифлосшавӣ ва таҳкими замина истифода мешаванд.Санҷишҳо ба чаҳор гурӯҳ тақсим карда шуданд: (1) Намунаҳои манфии GAPDH (“IAV-/IBV-”);(2) бо IAV сироятшуда («IAV+/IBV-») нисбат ба IAV ва GAPDH;(3) IBV-.сироятшуда (“IAV-”) -/IBV+”) IBV ва GAPDH;(4) сирояти IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) бо IAV, IBV ва GAPDH.Дар расм.5c нишон медиҳад, ки ҳангоми татбиқи намунаҳои манфӣ, шиддатнокии флуоресценти ΔRn камераи назорати мусбат 0,860 буд ва ΔRn IAV ва IBV ба назорати манфӣ (0,002) шабеҳ буд.Барои гурӯҳҳои IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ ва IAV+/IBV+ камераҳои IAV/GAPDH, IBV/GAPDH ва IAV/IBV/GAPDH мутаносибан шиддатнокии флуорессенсияро нишон доданд, дар ҳоле ки камераҳои дигар ҳатто шиддатнокии флуоресцентро дар замина нишон доданд. сатҳи 40 пас аз сикли гармидиҳӣ.Аз санҷишҳои дар боло овардашуда, платформаи FAST-POCT хусусияти барҷаста нишон дод ва ба мо имкон дод, ки ҳамзамон вирусҳои гуногуни зукомро патотипӣ кунем.
Барои тасдиқи татбиқи клиникии FAST-POCT, мо 36 намунаи клиникиро (намунаҳои тампончаи бинӣ) аз беморони IB (n=18) ва назорати ғайриIB (n=18) санҷидем (Расми 6а).Маълумот дар бораи беморон дар Ҷадвали иловагии 3 оварда шудааст. Ҳолати сирояти IB мустақилона тасдиқ карда шуд ва протоколи омӯзишӣ аз ҷониби беморхонаи якуми филиали Донишгоҳи Чжэцзян (Ханчжоу, Чжэцзян) тасдиқ карда шуд.Ҳар як намунаи беморон ба ду категория тақсим карда шуд.Яке бо истифода аз FAST-POCT ва дигаре бо истифода аз системаи PCR мизи корӣ (SLAN-96P, Чин) коркард карда шуд.Ҳарду таҳлил маҷмӯаҳои тозакунӣ ва муайянкуниро истифода мебаранд.Дар расм.6b натиҷаҳои FAST-POCT ва анъанавии транскрипсияи баръакси PCR (RT-PCR) нишон медиҳад.Мо шиддатнокии флуоресцентро (FAST-POCT) бо -log2(Ct) муқоиса кардем, ки дар он Ct ҳадди давра барои RT-PCR анъанавӣ мебошад.Дар байни ин ду усул мувофиқати хуб вуҷуд дошт.FAST-POCT ва RT-PCR таносуби қавии мусбатро бо арзиши таносуби Пирсон (r) 0,90 нишон доданд (Расми 6б).Сипас мо дурустии ташхиси FAST-POCT-ро арзёбӣ кардем.Тақсимоти шиддатнокии флуоресцентӣ (FL) барои намунаҳои мусбат ва манфӣ ҳамчун ченаки мустақили таҳлилӣ пешниҳод карда шуд (расми 6c).Қиматҳои FL дар беморони IB нисбат ба назоратчиён ба таври назаррас баландтар буданд (****P = 3,31 × 10-19; t-testи ду думдор) (расми 6d).Минбаъд, каҷҳои хусусиятҳои амалии қабулкунаки IBV (ROC) кашида шуданд.Мо дарёфтем, ки дурустии ташхис хеле хуб буда, майдони зери хатти 1 буд (расми 6е).Лутфан таваҷҷӯҳ намоед, ки аз сабаби фармоиши ҳатмии ниқоб дар Чин бинобар COVID-19 то соли 2020, мо беморони гирифтори IBD-ро муайян накардаем, аз ин рӯ ҳама намунаҳои мусбии клиникӣ (яъне намунаҳои тампончаи бинӣ) танҳо барои IBV буданд.
Тарҳрезии омӯзиши клиникӣ.Ҳамагӣ 36 намуна, аз ҷумла 18 намунаи беморон ва 18 назорати ғайри зуком, бо истифода аз платформаи FAST-POCT ва анъанавии RT-PCR таҳлил карда шуданд.b Мутобиқати таҳлилиро байни PCR FAST-POCT ва RT-PCR анъанавӣ арзёбӣ кунед.Натиҷаҳо ба таври мусбӣ алоқаманд буданд (Пирсон r = 0.90).c Сатҳи шиддатнокии флуоресцентӣ дар 18 беморони IB ва 18 назорати.d Дар беморони IB (+), арзишҳои FL нисбат ба гурӯҳи назоратӣ (-) ба таври назаррас баландтар буданд (**** P = 3.31 × 10-19; t-санҷи ду думдор; n = 36).Барои ҳар як қитъаи мураббаъ, аломати сиёҳ дар марказ миёнаравро ифода мекунад ва сатрҳои поён ва болои қуттӣ мутаносибан фоизи 25 ва 75-умро ифода мекунанд.Мӯйборҳо ба ҳадди ақал ва максималии маълумот паҳн мешаванд, ки онҳо берунӣ ҳисобида намешаванд.e каҷи ROC.Хати нуқтадор d арзиши ҳадди аз таҳлили ROC ҳисобшударо ифода мекунад.AUC барои IBV 1 аст. Маълумоти хом ҳамчун файлҳои маълумотҳои хом пешниҳод карда мешаванд.
Дар ин мақола мо FAST-ро пешниҳод менамоем, ки дорои хусусиятҳои зарурӣ барои POCT идеалӣ мебошад.Бартариҳои технологияи мо инҳоро дар бар мегиранд: (1) Миқдори бисёрҷониба (қаскад, ҳамзамон, пайдарпай ва интихобӣ), баровардан аз рӯи талабот (баромади зуд ва мутаносиби фишори татбиқшаванда) ва кори боэътимод (ларзиш дар 150 дараҷа) (2) нигоҳдории дарозмуддат (2 соли санҷиши суръатбахш, талафоти вазн тақрибан 0,3%);(3) қобилияти кор кардан бо моеъҳои дорои доираи васеи намнокӣ ва часпакӣ (вискозӣ то 5500 cP);(4) Иқтисодӣ (Арзиши тахминии моддии дастгоҳи PCR FAST-POCT тақрибан 1 доллари ИМА аст).Бо муттаҳид кардани диспенсерҳои бисёрфунксионалӣ, платформаи ҳамгирошудаи FAST-POCT барои муайянкунии PCR-и вирусҳои зукоми А ва В намоиш ва татбиқ карда шуд.FAST-POCT танҳо 82 дақиқа мегирад.Санҷишҳои клиникӣ бо 36 намунаи тампончаи бинӣ мувофиқати хубро дар шиддатнокии флуоресцент бо стандарти RT-PCR (коэффисиентҳои Пирсон > 0,9) нишон доданд.Санҷишҳои клиникӣ бо 36 намунаи тампончаи бинӣ мувофиқати хубро дар шиддатнокии флуоресцент бо стандарти RT-PCR (коэффисиентҳои Пирсон > 0,9) нишон доданд.Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответствие интенсивности флуорессенции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенти Пирсона > 0,9).Санҷишҳои клиникӣ бо 36 намунаи тампонҳои бинӣ бо шиддатнокии флуорессенсияи стандартии RT-PCR (коэффитсиентҳои Пирсон > 0,9) мувофиқати хуб нишон доданд. RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков аз носа показали хорошее совпадение интенсивности флуорессенции бо стандартной ОТ-ПЦР (коэффициент Пирсона > 0,9).Санҷиши клиникии 36 намунаи тампони бинӣ мувофиқати хуби шиддатнокии флуоресцентро бо стандарти RT-PCR (коэффисиенти Пирсон > 0,9) нишон дод.Дар баробари ин кор, усулҳои гуногуни биохимиявии падидомада (масалан, сикли гармии плазма, санҷишҳои иммунии бе тақвият ва таҳлилҳои функсионализатсияи нанокасе) потенсиали худро дар POCT нишон доданд.Бо вуҷуди ин, аз сабаби набудани платформаи пурра ҳамгирошуда ва мустаҳками POCT, ин усулҳо ногузир расмиёти пешакии алоҳидаро талаб мекунанд (масалан, изолятсияи РНК44, инкубатсия45 ва шустан46), ки минбаъд кори кунуниро бо ин усулҳо барои татбиқи вазифаҳои пешрафтаи POCT бо параметрҳои зарурӣ.иҷрои натиҷагирӣ дар ҷавоб.Дар ин кор, гарчанде насоси ҳавоӣ, ки барои фаъол кардани клапани FAST истифода мешавад, ба қадри кофӣ хурд аст, ки ба асбоби мизи корӣ ворид карда шавад (расми S9, S10), он ҳанӯз ҳам қувваи назаррасро сарф мекунад ва садо эҷод мекунад.Аслан, насосҳои пневматикии форма-фактори хурдтарро метавон бо дигар воситаҳо иваз кард, ба монанди истифодаи қувваи электромагнитӣ ё фаъолкунии ангушт.Такмилҳои минбаъда метавонанд, масалан, мутобиқгардонии маҷмӯаҳо барои таҳлилҳои гуногун ва мушаххаси биохимиявӣ, бо истифода аз усулҳои нави муайянкунӣ, ки системаҳои гармидиҳӣ/сардкуниро талаб намекунанд ва ба ин васила платформаи POCT-и бе асбоб барои барномаҳои PCR таъмин карда шаванд.Мо боварӣ дорем, ки бо назардошти он, ки платформаи FAST роҳи коркарди моеъҳоро фароҳам меорад, мо боварӣ дорем, ки технологияи пешниҳодшудаи FAST имкон медиҳад, ки на танҳо барои озмоиши биотиббӣ, балки барои мониторинги муҳити зист, санҷиши сифати ғизо, синтези мавод ва маводи мухаддир як платформаи умумӣ эҷод кунад. ..
Ҷамъоварӣ ва истифодаи намунаҳои тампончаи бинии инсон аз ҷониби Кумитаи этикаи беморхонаи якуми Донишгоҳи Чжэцзян (IIT20220330B) тасдиқ шудааст.36 намунаи тампончаи бинӣ ҷамъоварӣ карда шуд, ки дар онҳо 16 калонсолони то 30 сола, 7 калонсолон > 40 сола ва 19 мард, 17 зан буданд.36 намунаи тампончаи бинӣ ҷамъоварӣ карда шуд, ки дар онҳо 16 калонсолони то 30 сола, 7 калонсолон > 40 сола ва 19 мард, 17 зан буданд.Было собрано 36 образцов мазков аз носа, дар китои худ 16 взрослых < 30 сола, 7 взрослых старше 40 сола, 19 мужчин ва 17 зан.36 намунаи тампони бинии аз 16 калонсолони то 30-сола, 7 калонсолони аз 40-сола боло, 19 мард ва 17 зан ҷамъоварӣ карда шуданд..Маълумоти демографӣ дар Ҷадвали иловагии 3 оварда шудааст. Аз ҳамаи иштирокчиён розигии огоҳона гирифта шудааст.Ҳама иштирокчиён ба гирифтории зуком гумонбар шуданд ва ихтиёран бидуни ҷуброн аз санҷиш гузаронида шуданд.
Пойгоҳ ва сарпӯши FAST аз кислотаи полилактикӣ (PLA) сохта шудаанд ва аз ҷониби принтери Ender 3 Pro 3D (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.) чоп карда шудаанд.Лентаи дутарафа аз Adhesives Research, Inc. Модели 90880 харида шудааст. Плёнкаи PET-и ғафсии 100 мкм аз МакМастер-Карр харида шудааст.Ҳам илтиёмӣ ва ҳам филми ПЭТ бо истифода аз буридани Silhouette Cameo 2 аз Silhouette America, Inc. бурида шуданд. Плёнкаи чандирӣ аз маводи PDMS тавассути қолаби сӯзандору сохта шудааст.Аввалан, чаҳорчӯбаи ғафсии 200 мкм бо истифода аз системаи лазерӣ бурида шуд ва ба варақи ғафсии PMMA 3 мм бо истифода аз лентаи илтиёмии дутарафаи 100 мкм часпонида шуд.Пас аз он прекурсори PDMS (Sylgard 184; Қисми A: Қисми B = 10:1, Dow Corning) ба қолаб рехта шуд ва барои нест кардани PDMS зиёдатӣ як чӯбчаи шишагӣ истифода шуд.Пас аз табобат дар 70 ° C. барои 3 соат, филми ғафси 300 мкм PDMS-ро аз қолаб канда кардан мумкин аст.
Аксҳо барои паҳнкунии ҳамаҷониба, нашри дархост ва иҷрои боэътимод бо камераи баландсуръат (Sony AX700 1000 fps) гирифта мешаванд.Шакери орбиталӣ, ки дар санҷиши эътимод истифода мешавад, аз SCILOGEX (SCI-O180) харида шудааст.Фишори ҳаво аз ҷониби компрессори ҳаво тавлид мешавад ва барои танзими арзиши фишор чанд танзимгари фишори рақамии дақиқ истифода мешавад.Раванди санҷиши рафтори ҷараён чунин аст.Миқдори пешакӣ муайяншудаи моеъ ба дастгоҳи санҷишӣ ворид карда шуд ва барои сабт кардани рафтори ҷараён камераи баландсуръат истифода шуд.Пас аз он тасвирҳо аз видеоҳои рафтори ҷараён дар вақтҳои муқарраршуда гирифта шуданд ва майдони боқимонда бо истифода аз нармафзори Image-Pro Plus ҳисоб карда шуд, ки баъдан барои ҳисоб кардани ҳаҷм ба умқи камера зарб карда шуд.Тафсилоти системаи санҷиши рафтори ҷараёнро дар расми иловагии S4 пайдо кардан мумкин аст.
Ба дастгоҳи омехтакунии шиша 50 мкл микроб ва 100 мкл оби деионизатсияшуда ворид кунед.Суратҳои омехта бо камераи баландсуръат ҳар 0,1 сония дар фишори 0,1 бар, 0,15 бар ва 0,2 бар гирифта шуданд.Маълумоти пикселро дар ҷараёни омехтакунӣ аз ин тасвирҳо бо истифода аз нармафзори коркарди аксҳо (Photoshop CS6) гирифтан мумкин аст.Ва самаранокии омехтаро бо муодилаи зерини 53 ба даст овардан мумкин аст.
ки дар он M самаранокии омехта аст, N шумораи умумии пикселҳои намунавӣ ва ci ва \(\bar{c}\) консентратсияи муқарраршуда ва интизоршаванда мебошанд.Самаранокии омехта аз 0 (0%, омехтанашуда) то 1 (100%, пурра омехта) аст.Натиҷаҳо дар расми иловагии S6 нишон дода шудаанд.
Маҷмӯаи RT-PCR дар вақти воқеӣ барои IAV ва IBV, аз ҷумла намунаҳои IAV ва IBV RNA (кат. № RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, Чин), буфери Tris-EDTA ( буфери TE № B541019 , Sangon Biotech, Чин), Маҷмӯаи Positive Control RNA Purification (Қисми № Z-ME-0010, Liferiver, Чин) ва GAPDH Solution (Қисми № M591101, Sangon Biotech, Чин) дар тиҷорат дастрасанд.Маҷмӯи тозакунии РНК буфери ҳатмӣ, шустани А, шустани W, элюент, микробҳои магнитӣ ва интиқолдиҳандаи акрилиро дар бар мегирад.Маҷмӯаҳои IAV ва IBV дар вақти воқеии RT-PCR омехтаи муайянкунии PCR кислотаи нуклеинии IFVA ва ферментҳои RT-PCR-ро дар бар мегиранд.Ба 500 мкл маҳлули буфери ҳатмӣ 6 мкл AcrylCarrier ва 20 мкл дандонҳои магнитиро илова кунед, хуб ҷунбонед ва сипас маҳлули маҳлулро омода кунед.Ба шустани А ва В 21 мл этанол илова карда, хуб такон дода, мутаносибан маҳлулҳои шустани А ва В ҳосил кунед.Сипас, 18 мкл омехтаи флуоресцентии ПТР бо кислотаи нуклеини IFVA ва 1 мкл ферменти RT-PCR ба 1 мкл маҳлули TE илова карда, ларзонда ва центрифуга дар тӯли чанд сония, ба даст овардани 20 мкл праймерҳои IAV ва IBV шуданд.
Тартиби тозакунии РНК-ро риоя кунед: (1) адсорбсияи РНК.526 мкл маҳлули пеллетро пипетка ба найчаи центрифугаи 1,5 мл гузаронед ва 150 мкл намуна илова кунед, сипас найчаро 10 маротиба боло ва поён такон диҳед.676 мкл омехтаро ба сутуни наздикшавӣ интиқол диҳед ва дар 1,88 x 104 г барои 60 сония центрифуга кунед.Дренажҳои минбаъда пас аз он партофта мешаванд.(2) Марҳилаи аввали шустан.Ба сутуни наздикшавӣ 500 мкл маҳлули шустани А илова кунед, дар 1,88 x 104 г барои 40 сония центрифуга кунед ва маҳлули сарфшударо партоед.Ин раванди шустан ду маротиба такрор карда шуд.(3) марҳилаи дуюми шустан.Ба сутуни наздикшавӣ 500 мкл маҳлули шустани W илова кунед, дар 1,88 × 104 г барои 15 сония центрифуга кунед ва маҳлули сарфшударо партоед.Ин раванди шустан ду маротиба такрор карда шуд.(4) Элюсия.Ба сутуни наздикшавӣ 200 мкл элюат илова кунед ва дар 1,88 x 104 г барои 2 дақиқа центрифуга кунед.(5) RT-PCR: Элюат ба 20 мкл маҳлули праймер дар як найчаи ПТР ворид карда шуд, сипас қубур дар дастгоҳи санҷиши PCR дар вақти воқеӣ (SLAN-96P) барои анҷом додани раванди RT-PCR ҷойгир карда шуд.Тамоми раванди муайянкунӣ тақрибан 140 дақиқаро мегирад (20 дақиқа барои тозакунии РНК ва 120 дақиқа барои муайянкунии PCR).
526 мкл маҳлули бед, 1000 мкл маҳлули шустани А, 1000 мкл маҳлули шустани W, 200 мкл элюат ва 20 мкл маҳлули праймер пешакӣ илова карда шуда, дар камераҳои M, W1, W2, E ва камераҳои детектории ПТР нигоҳ дошта шуданд.Маҷмаи платформа.Сипас, 150 мкл намуна ба камераи M пипета карда шуд ва платформаи FAST-POCT ба асбоби санҷишӣ, ки дар расми иловагии S9 нишон дода шудааст, ворид карда шуд.Пас аз тақрибан 82 дақиқа, натиҷаҳои санҷиш дастрас шуданд.
Агар тартиби дигаре зикр нагардида бошад, ҳамаи натиҷаҳои санҷиш пас аз ҳадди ақал шаш такрор бо истифода аз платформаи FAST-POCT ва намунаҳои аз ҷиҳати биологӣ мустақил ҳамчун миёна ± SD пешниҳод карда мешаванд.Ягон маълумот аз таҳлил хориҷ карда нашудааст.Таҷрибаҳо тасодуфӣ нестанд.Тадқиқотчиён дар давоми озмоиш ба вазифаҳои гурӯҳӣ кӯр набуданд.
Барои маълумоти бештар дар бораи тарҳрезии омӯзиш, ба реферат Ҳисоботи Тадқиқоти Табиат нигаред, ки ба ин мақола алоқаманд аст.
Маълумоте, ки натиҷаҳои ин тадқиқотро дастгирӣ мекунанд, дар Маълумоти иловагӣ дастрасанд.Ин мақола маълумоти аслӣ медиҳад.
Чагла, З. ва Мадхукар, П. Боостерҳои COVID-19 дар кишварҳои сарватманд ваксинаҳоро барои ҳама ба таъхир меандозанд.Чагла, З. ва Мадхукар, П. Боостерҳои COVID-19 дар кишварҳои сарватманд ваксинаҳоро барои ҳама ба таъхир меандозанд.Чагла, З. ва Мадхукар, П. Боотерҳои COVID-19 дар кишварҳои сарватманд ваксинаҳоро барои ҳама ба таъхир меандозанд.Чагла, З. ва Мадхукар, П. Реваксинатсияи COVID-19 дар кишварҳои сарватманд эмгузарониро барои ҳама ба таъхир меандозад.Тибби миллй.27, 1659–1665 (2021).
Фауст, Л.Озмоиши SARS-CoV-2 дар кишварҳои камдаромад ва миёна: дастрасӣ ва дастрасӣ дар бахши хусусии тандурустӣ.сирояти микроб.22, 511–514 (2020).
Созмони Ҷаҳонии Тандурусти.Паҳншавӣ ва паҳншавии глобалии сироятҳои интихобшудаи бо роҳи ҷинсӣ гузаранда: барраси ва ҳисобҳо.Женева: ТУТ, ТУТ/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
Фентон, EM ва дигарон.Тасмаҳои санҷишии ҷараёни 2D-и сершумор.Барномаи ASS.алмаматер.Интер Милан.1, 124–129 (2009).
Шиллинг, КМ ва дигарон.Дастгоҳи таҳлили коғазии микрофлюидикии пурра басташуда.анус.химиявй.84, 1579–1585 (2012).
Лапентер, Н.Иммунохроматографияи рақобатпазири коғазӣ дар якҷоягӣ бо электродҳои аз ҷониби фермент тағирёфта имкон медиҳад, ки мониторинги бесим ва муайян кардани электрохимиявии котинини пешобро анҷом диҳад.Сенсорҳо 21, 1659 (2021).
Чжу, X. ва дигарон.Миқдори биомаркерҳои беморӣ бо платформаи бисёрҷонибаи моеъи паҳлуии нанозим бо истифода аз глюкометр.сенсори биологӣ.Биоэлектроника.126, 690–696 (2019).
Бу, С ва дигарон.Тасмаҳои санҷиши ҳомиладорӣ барои ошкор кардани бактерияҳои патогенӣ бо истифода аз конканавалин А-гонадотропини инсон-хорионикии инсон-Cu3(PO4)2 наногулҳои гибридии, ҷудокунии магнитӣ ва хондани телефони интеллектуалӣ.Микрокомпьютер.Маҷалла.185, 464 (2018).